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用色差計(jì)對(duì)番茄紅素進(jìn)行快速測(cè)定的方法

來(lái)源: http://www.yuanweishulai.cn  類別:實(shí)用技術(shù)  更新時(shí)間:2021-01-22  閱讀

  番茄紅素是決定番茄外觀品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的重要因素,是加工番茄品種改良過(guò)程中最受重視的經(jīng)濟(jì)性狀。在番茄果實(shí)成熟過(guò)程中,大量的葉綠素逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榉鸭t素和其他類胡蘿卜素(如胡蘿卜素、葉黃素等)。番茄紅素在類胡蘿卜素中所占的比例既與番茄果實(shí)的成熟度有關(guān)。色差計(jì)是根據(jù)各種類胡蘿卜素的光吸收特性而設(shè)計(jì)的,利用該色差計(jì)測(cè)得的L,a,b值成為許多實(shí)驗(yàn)室估測(cè)番茄樣品中番茄紅素含量的依據(jù),并被直接用來(lái)進(jìn)行QTL定位。但這些讀數(shù)是否能夠靈敏地檢測(cè)不同基因型間番茄紅素含量的真實(shí)差異,迄今沒(méi)有見(jiàn)到相關(guān)的報(bào)道。為了確定色差計(jì)在番茄優(yōu)質(zhì)育種中的應(yīng)用價(jià)值,本研究選擇了一批番茄紅素含量差異較大的基因型,對(duì)番茄紅素快速測(cè)定方法的有效性進(jìn)行了檢驗(yàn)。

  色差計(jì)攜帶方便,操作簡(jiǎn)便,具有數(shù)據(jù)貯存和保持樣品原有特性的功能,所以,被國(guó)內(nèi)外的許多實(shí)驗(yàn)室用來(lái)測(cè)定番茄果實(shí)和番茄醬中的番茄紅素含量。Airsa等人根據(jù)不同的成熟度把番茄分成綠熟、黃熟、橘紅、淡紅、紅、大紅、軟紅7個(gè)時(shí)期,以這7個(gè)時(shí)期的番茄果實(shí)為材料,研究了色差計(jì)的讀數(shù)值與番茄紅素含量的關(guān)系,認(rèn)為番茄紅素含量和a,/ab值呈極顯著的線性回歸關(guān)系,但最明顯的線性區(qū)間實(shí)際上在黃熟到紅熟期之間,紅熟到軟紅的3個(gè)點(diǎn)差異并不明顯。本研究全部以完全成熟(即大紅期)的果實(shí)為材料,研究色差計(jì)的讀數(shù)值與番茄紅素含量的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)完整果實(shí)的色差計(jì)讀數(shù)值與番茄紅素含量沒(méi)有明顯的相關(guān)趨勢(shì),1L,la,lb呈隨機(jī)分布;但以含自由水的番茄漿和不含自由水的番茄醬為材料時(shí),色差計(jì)的讀數(shù)值L和b與番茄紅素含量呈現(xiàn)出明顯的負(fù)相關(guān)趨勢(shì),a則呈正相關(guān)趨勢(shì),相對(duì)而言,L和b的分布比較集中,a值的分布離散性較大;從絕對(duì)值來(lái)看,多數(shù)基因型的lL>u>3L,lb>2b>3b,惟獨(dú)a的次序是1a>3a>2a。果實(shí)和番茄漿的差別主要表現(xiàn)在光源和均質(zhì)性2個(gè)方面,以果實(shí)為材料時(shí),CR-400型色差計(jì)既測(cè)定了儀器內(nèi)部脈沖氨氣燈的反射光,同時(shí)也可能測(cè)定了果實(shí)周圍散射光的反射光,所以讀數(shù)值偏高,穩(wěn)定性也較差,同一果實(shí)因?yàn)槭芄饷娌煌?番茄紅素的分布也不同,于是讀數(shù)值表現(xiàn)出較大的隨機(jī)誤差;與果實(shí)不同的是,果醬在樣品盒中測(cè)定時(shí)能夠排除環(huán)境中散射光的干擾,經(jīng)過(guò)粉碎攪拌后均質(zhì)性也比較好,所以讀數(shù)值的穩(wěn)定性較好,隨機(jī)誤差較小。由此可見(jiàn),用色差計(jì)測(cè)定果實(shí)的番茄紅素含量,不能反映客觀事實(shí),沒(méi)有參考價(jià)值。

  色差計(jì)的讀數(shù)值轉(zhuǎn)換成a/b后,與番茄紅素含量的線性相關(guān)系數(shù)得到了提高,這與Aiars川等人的結(jié)果相同。但前人定義的色光值與番茄紅素含量并沒(méi)有顯著的相關(guān)性。根據(jù)3種讀數(shù)值變化趨勢(shì),我們?cè)O(shè)計(jì)另外2種轉(zhuǎn)換也與番茄紅素含量表現(xiàn)出明顯的線性相關(guān),其中(a3b/3十a(chǎn)/33L)與番茄紅素含量的相關(guān)系數(shù)最大。從實(shí)測(cè)值來(lái)看,3a呈隨機(jī)分布,番茄紅素含量最高的基因型,其果醬的a值并不高,但b值和L值都很低,所以,果實(shí)成熟后期,b值和L值下降得越快,意味著番茄紅素積累的越多。

  果漿和離心后的果醬的區(qū)別就是自由水的含量。多數(shù)基因型的21>3L,2b>3b,但2a<3a,這種變化顯然是由自由水含量引起的,自由水越少,L和b似乎越穩(wěn)定。所以,a3/b3和(a3/b3+a3/U)與番茄紅素含量的線性相關(guān)程度明顯地高于2a/2b和(2a/bZ十a(chǎn)Z/硯)。為了確定自由水的影響力,我們以58個(gè)樣品的自由水含量為依據(jù),把它們分成3組,結(jié)果在自由水含量適中(17.n%一67.02%)的基因型中,它們的色差計(jì)讀數(shù)及其轉(zhuǎn)換值與番茄紅素含量都呈顯著的線性相關(guān),特別是(a3/3b+3a/31)與番茄紅素含量的相關(guān)系數(shù)達(dá)到了0.880”。此時(shí)建立的線性回歸方程yl二7.707470+4.917062(a3兒3+a3/L3一3.539115),能夠比較準(zhǔn)確地根據(jù)色差計(jì)的讀數(shù)值估測(cè)果實(shí)中番茄紅素的含量,這對(duì)于以提高番茄紅素含量為主要目標(biāo)的優(yōu)質(zhì)育種具有重要意義,育種家可以通過(guò)色差計(jì)來(lái)初選高番茄紅素的優(yōu)良基因型。

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