飼料中脂肪含量測定的幾個建議

　　脂肪是飼料及其原料中僅次于蛋白質(zhì)的主要品質(zhì)項(xiàng)目，目前其含量的測定普遍使用國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433 - 1994,采用索氏（Soxhlet）抽提原理，影響檢測結(jié)果的主要因素有樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時間、大平和烘箱的準(zhǔn)確度、抽提裝置的性能、環(huán)境溫度、所用器具清潔度、樣品中水分含量水平、操作人員水平等。筆者在日常檢測的具體操作過程，有時遇到檢測結(jié)果受某些因素影響而不穩(wěn)定的現(xiàn)象。為探討出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因，我們就樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時間這3個主要影響因素對魚粉、豆粕、大豆粉分別進(jìn)行分析探討和調(diào)控試驗(yàn)。

　　1 材料和方法

　　1.1樣品的采集和制備

　　隨機(jī)選用經(jīng)廣州黃埔港入境的魚粉、豆粕、大豆粉。樣品的抽取和制備按SN/T 0800.1- 1999《進(jìn)出口糧油、飼料檢驗(yàn)抽樣和制樣方法》進(jìn)行。

　　1.2主要儀器與試劑

　　磨樣機(jī)，KNIFETEC 1095型；標(biāo)準(zhǔn)篩，BS 410/1986;脂肪測定儀；烘箱，東方B型；粗大平，PB5001,感量O.lg;分析大平，AE163,感量O.OOOlg;所需試劑主要是分析純乙醚和沸點(diǎn)范圍3060 0C的石油醚（ 30#） o1.3試驗(yàn)方法根據(jù)日常檢驗(yàn)工作遇到的實(shí)際問題，就不同樣品顆粒、不同抽提溶劑、不同抽提時間，參照現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6433- 1994《飼料粗脂肪測定方法》中的儀器法進(jìn)行脂肪含量測定。

　　1.4評判依據(jù)

　　按現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測定方法》中對實(shí)驗(yàn)結(jié)果限差的規(guī)定來評價(jià)測定結(jié)果數(shù)據(jù)的有效性。該國標(biāo)規(guī)定：當(dāng)脂肪含量大于或等于10%時，允許相對偏差為3%;當(dāng)脂肪含量小于10%時，允許相對偏差為5%01.5主要計(jì)算公式1.5.1月旨肪含量脂肪含量（%）=（抽提后鋁杯恒重一抽提前鋁杯恒重）/風(fēng)干試樣重量X1001.5.2相對偏差相對偏差=（測量值一平均值）/平均值X100%

　　2 結(jié)果和分析

　　2.1不同樣品顆粒大小對飼料脂肪抽提效果的影響

    在現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測定方法》中，脂肪成分的提取主要是通過將樣品浸泡在抽提溶劑中由抽提溶劑洗滌樣品來實(shí)現(xiàn)的。樣品顆粒的大小直接影響到樣品能和抽提溶劑接觸的廣度和深度，這將直接影響到所測樣品脂肪成分的提�。ㄝ腿。┬�率。通常在相同的試驗(yàn)條件卜，樣品顆粒越小，脂肪成分的提�。ㄝ腿。┬�率越高，所測得樣品的脂肪含量也會高一些。在日常檢驗(yàn)工作中，有時懷疑因樣品研磨不夠細(xì)致而導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低。木文以現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994規(guī)定的0.45 mm（40目）顆粒大小為基礎(chǔ)，隨機(jī)選用魚粉原樣（即未經(jīng)任何磨制）和經(jīng)日常研磨方式（KNIFETEC 1095型磨樣機(jī)，選2s或Ss模式，運(yùn)轉(zhuǎn)次數(shù)視樣品性狀而定）制備的大豆粉、豆粕樣品作為試驗(yàn)組。對所有實(shí)驗(yàn)樣品分別用1 mm X18目）， 0.45 mm X40目）， 0.212mm（70目）標(biāo)準(zhǔn)篩篩分檢查樣品顆粒大小的分布情況，詳見表1.對將作為參照組的樣品，如有0.45~篩上物的增加磨制時間，直到全部過0.45~篩。然后，對所有樣品用乙醚作抽提溶劑。浸泡15min,淋洗45min進(jìn)行脂肪含量檢測。

　　2.2不同抽提溶劑對飼料脂肪檢測結(jié)果的影響

　　現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測定方法》中規(guī)定用分析純乙醚作為抽提溶劑。

　　乙醚又名二乙醚，由濃硫酸與乙醇共熱至130140℃時蒸餾而制得，沸點(diǎn)34.5 0C,相對密度0.714,易溶于乙醇和氯仿等，是良好的抽提試劑。但乙醚蒸氣和空氣的混合物極易爆炸，爆炸極限為1.85%一36.5%（體積）。另外，用于脂肪抽提實(shí)驗(yàn)后的乙醚，由于含有較多氧化物，其收集、儲存、回收等方而存在安全隱患。因此，我們選用較為安全的石油醚，沸點(diǎn)范圍3060 0C,相對密度0.630.66.石油醚由大然石油或人造石油經(jīng)分餾而得，主要是戊烷和己烷等低分子量烴類的混合物，也是無色可燃易揮發(fā)澄清液體，不溶于水，溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑，能溶解油和脂肪，多用做溶劑或化學(xué)試劑。我們參照現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6433-1994中儀器法，分別對3個大豆粉、3個豆粕和3個魚粉共9個樣品分別用乙醚和石油醚作為抽提溶劑進(jìn)行浸泡15min,淋洗45 min的試驗(yàn)。

　　2.3不同浸洗時間對飼料脂肪抽提效果的影響

　　由于現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測定方法》的原理屬于重量分析法，所測得樣品脂肪含量的數(shù)值與該樣品在浸提前后兩者的質(zhì)量差值有直接聯(lián)系，相同試驗(yàn)條件卜，隨著浸提時間的延長，該樣品在浸提前后兩者的質(zhì)量差值會增大，所測得樣品的脂肪含量也會高一些。在日常檢驗(yàn)實(shí)踐中，我們有時懷疑因浸洗時間過短而導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低，木文以脂肪自動測定儀（2050型）操作說明書推薦的抽提時間60min其中浸泡15min,淋洗45 min）為基礎(chǔ)，分別增設(shè)浸泡30min ,淋洗45 min和浸泡15min,淋洗90min兩種抽提方式，對日常檢驗(yàn)工作量較大的飼料用大豆粉、魚粉以乙醚作抽提溶劑進(jìn)行試驗(yàn)。

　　3 結(jié)論和建議

　　木文結(jié)合筆者在日常檢測的具體操作過程和檢驗(yàn)工作實(shí)踐中，遇到檢測結(jié)果受某些因素影響而有結(jié)果出入的現(xiàn)象，以常用飼料原料魚粉、豆粕、大豆粉做研究對象，通過對樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時間這3個影響脂肪含量測定的主要因素分別進(jìn)行分析探討和調(diào)控試驗(yàn)，初步結(jié)果表明：（1）對大豆粉、豆粕、魚粉樣品，顆粒研磨至1.00~以卜。月旨肪抽提效果就可以達(dá)到現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994的規(guī)定；（ 2）用乙醚和與乙醚沸點(diǎn)相近的石油醚作為抽提溶劑來檢測大豆粉、豆粕、魚粉中脂肪含量的效果是一致的；（3）浸泡30min ,淋洗45 min和浸泡15min ,淋洗90min與浸泡15min,淋洗45 min的抽提效果，在實(shí)驗(yàn)誤差范圍內(nèi)是一致的。

　　在現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測定方法》中，脂肪成分的提取主要是靠有機(jī)溶劑來萃取，萃取過程中，除脂肪外，還有有機(jī)酸、磷脂、脂溶性維生素、色素等也溶到萃取液中，最終留在浸提鋁杯里與脂肪一起恒重，影響試驗(yàn)，所以該國標(biāo)也說明測定結(jié)果為“粗脂肪”或乙醚提取物。因此筆者建議：

　　（1）樣品顆粒研磨至1.00~以卜，月旨肪抽提效果就可以達(dá)到現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994的規(guī)定；

　�。�2）為消除安全隱患，可選用沸點(diǎn)范圍為3060 0C的石油醚來代替乙醚作抽提溶劑；

　�。�3）抽提時間以脂肪自動測定儀操作說明書推薦的60min其中浸泡15min,淋洗45min）為宜。