凱氏定氮儀對(duì)蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量的測(cè)定改進(jìn)
來(lái)源： http://yuanweishulai.cn/ 類(lèi)別：實(shí)用技術(shù) 更新時(shí)間：2014-03-24 閱讀次
蜂產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值十分豐富，是人們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ?jiàn)的綠色保健品。蜂產(chǎn)品的蛋白質(zhì)含量是十分可觀(guān)的，其測(cè)定方法主要是采用凱氏定氮儀進(jìn)行測(cè)定的。但是這種方法操作起來(lái)十分繁瑣，消化的時(shí)間也比較長(zhǎng)，需要蒸餾滴定，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。但是通過(guò)改進(jìn)消化條件,即采用過(guò)氧化氫-濃硫酸混合液為消化液,消化過(guò)程中滴加硝酸-高氯酸混合酸,縮短了消化時(shí)間。樣品中的蛋白質(zhì)與硫酸和催化劑一同加熱分解,生成的氨與硫酸反應(yīng)生成硫酸銨,硫酸銨在堿性溶液中與次氯酸鹽生成一氯胺,在亞硝基鐵氰化鈉催化作用下與水楊酸生成藍(lán)色化合物,可在655nm波長(zhǎng)下比色定量。
稱(chēng)取樣品2.0g于250mL定氮瓶中,加入硫酸銅0.5g,硫酸鉀5.0g,硫酸-過(guò)氧化氫(2+1)混合液20mL;搖勻后于瓶口放一小漏斗,置于有石棉網(wǎng)的可調(diào)電爐上,小火加熱,至泡沫停止后,加大火力,緩慢分次滴加硝酸-高氯酸(4+1)混合酸2~3mL,樣液變藍(lán)透明后,繼續(xù)加熱30min,取下放冷后,加水20mL,冷卻后分次洗入500mL(蜂蜜消化液洗入250mL)容量瓶中。移取樣品消化液5.0mL于另一個(gè)100mL容量瓶中,加水至刻度備用,同時(shí)作試劑空白。
通過(guò)改進(jìn)凱氏定氮儀對(duì)蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)消化的條件,有效地縮短了反應(yīng)時(shí)間,由原來(lái)的3.5h縮至2h左右。由于水楊酸光度法樣品消化液不需要蒸餾,直接用于測(cè)定,更適宜于批量樣品的測(cè)定,水楊酸光度法與國(guó)標(biāo)法比較無(wú)顯著性差異,所以水楊酸光度法因其操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、迅速,可用于蜂產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的測(cè)定。凱氏定氮儀對(duì)蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量的檢測(cè)結(jié)果十分精準(zhǔn)，可以采用。
稱(chēng)取樣品2.0g于250mL定氮瓶中,加入硫酸銅0.5g,硫酸鉀5.0g,硫酸-過(guò)氧化氫(2+1)混合液20mL;搖勻后于瓶口放一小漏斗,置于有石棉網(wǎng)的可調(diào)電爐上,小火加熱,至泡沫停止后,加大火力,緩慢分次滴加硝酸-高氯酸(4+1)混合酸2~3mL,樣液變藍(lán)透明后,繼續(xù)加熱30min,取下放冷后,加水20mL,冷卻后分次洗入500mL(蜂蜜消化液洗入250mL)容量瓶中。移取樣品消化液5.0mL于另一個(gè)100mL容量瓶中,加水至刻度備用,同時(shí)作試劑空白。
通過(guò)改進(jìn)凱氏定氮儀對(duì)蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)消化的條件,有效地縮短了反應(yīng)時(shí)間,由原來(lái)的3.5h縮至2h左右。由于水楊酸光度法樣品消化液不需要蒸餾,直接用于測(cè)定,更適宜于批量樣品的測(cè)定,水楊酸光度法與國(guó)標(biāo)法比較無(wú)顯著性差異,所以水楊酸光度法因其操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、迅速,可用于蜂產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的測(cè)定。凱氏定氮儀對(duì)蜂產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量的檢測(cè)結(jié)果十分精準(zhǔn)，可以采用。
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