植物間蛋白質(zhì)多樣性的變化特點(diǎn)
中藥質(zhì)量及穩(wěn)定性研究是中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中不可或缺的內(nèi)容。國(guó)內(nèi)外許多專(zhuān)家學(xué)者進(jìn)行了大量研究,主要集中在采用化學(xué)藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的“5P”模式、生物效應(yīng)模式等對(duì)中藥形成各個(gè)環(huán)節(jié)中可控因素( 外部因素) 進(jìn)行全面控制,取得了可喜的成效。在生長(zhǎng)過(guò)程中各植株間蛋白質(zhì)變異情況,從蕺菜植株間蛋白質(zhì)的種類(lèi)及相對(duì)量進(jìn)行多樣性研究,為后續(xù)關(guān)鍵蛋白酶的尋找與“節(jié)點(diǎn)代謝網(wǎng)絡(luò)”的構(gòu)建奠定基礎(chǔ)。電泳分析結(jié)束后立即將蛋白凝膠用濾紙吸干,放在玻璃板上輕輕壓平后,于薄層掃描儀內(nèi)進(jìn)行定量掃描,并借鑒本實(shí)驗(yàn)室所建的總量統(tǒng)計(jì)矩原理來(lái)進(jìn)行蕺菜株間蛋白質(zhì)的多態(tài)性分析。
再者,基因控制生物性狀的表達(dá),而蛋白質(zhì)又是生物性狀的體現(xiàn)者,基因通過(guò)一系列傳遞( 中心法則) 將自己的遺傳信息通過(guò)蛋白質(zhì)表達(dá)出來(lái)。那么,基因的多態(tài)性必將引起蛋白質(zhì)的多樣性,而蛋白質(zhì)是生物代謝酶的重要組成部分,這種蛋白質(zhì)( 酶) 的多樣性在參與植物中藥的代謝過(guò)程時(shí)使得“中藥成分”的變異性最終體現(xiàn)為中藥質(zhì)量的不穩(wěn)定性。因此,研究中藥的蛋白質(zhì) ( 酶) 的多樣性是基因多態(tài)性研究的升華,其在中藥質(zhì)控研究中顯得更重要、更直觀、更確切。
證實(shí)了同一種源同一GAP種植基地產(chǎn)出的同一批次的蕺菜植株間蛋白質(zhì)總含量存在較大的差異。也就是說(shuō)總蛋白的株間總蛋白含量具有多樣性特征,而具體是蛋白酶種類(lèi)上的差異,還是數(shù)量上的差異,還需進(jìn)一步探討。對(duì)比觀察后不難發(fā)現(xiàn) 53 株蕺菜總蛋白各條帶的分辨率較差,多數(shù)相鄰條帶出現(xiàn)重疊,說(shuō)明蛋白種類(lèi)豐富; 各樣品總蛋白電泳圖在相應(yīng)位置似乎都出現(xiàn)了條帶,這預(yù)示了各植株間的蛋白種類(lèi)的差異性較小,但顏色深淺不一,這說(shuō)明了株間蛋白多樣性主要體現(xiàn)在各種類(lèi)蛋白的含量差異性方面,可以通過(guò)對(duì)電泳圖進(jìn)行薄層掃描來(lái)進(jìn)一步研究。
薄層色譜掃描法則是以蛋白條帶顏色深淺與蛋白區(qū)帶含量成正比來(lái)定量分析研究,從蛋白質(zhì)指紋圖譜角度并借鑒本實(shí)驗(yàn)室所創(chuàng)建的總量統(tǒng)計(jì)矩原理,通過(guò)峰面積相對(duì)百分含量分析其蛋白多樣性,說(shuō)明蕺菜蛋白質(zhì)株間在種類(lèi)上存在一定的多樣性,但在各蛋白種類(lèi)的含量上差異較大,引起各植株質(zhì)量不穩(wěn)定。而這種蛋白質(zhì)的差異性與其成分間的關(guān)聯(lián)性,有待進(jìn)一步研究探討。中國(guó)糧油儀器在線 http://yuanweishulai.cn/