凱氏定氮儀對刺槐花蛋白質(zhì)等營養(yǎng)元素的測定
來源： http://yuanweishulai.cn/ 類別：實用技術(shù) 更新時間：2015-03-31 閱讀次
刺槐的嫩葉花在現(xiàn)代營養(yǎng)角度來說含有豐富的蛋白質(zhì)、糖。和氨基酸、酶及多種微量元素。不再僅僅只有單純的要用價值了。擁有這么多的營養(yǎng)價值，已然被放上了人們的餐桌了。因為蛋白質(zhì)是人體三大營養(yǎng)素之一，是一切生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成人體新生組織、維持人體健康的重要成分。那么，刺槐花的蛋白質(zhì)含量如何檢測呢？主要的檢測儀器當(dāng)然還是凱氏定氮儀。
凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)的主要原理是，蛋白質(zhì)是含氮的有機化合物。刺槐花中含氮的有機化合物與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)含量。
凱氏定氮儀具體的操作細(xì)節(jié)如下：
精密稱取樣品2.0g于500mL干燥的凱氏定氮瓶中，加入硫酸鉀6.0g、硫酸銅0.2g以及濃硫酸20mL，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上，小火加熱，待內(nèi)容物全部炭化，泡沫完全停止后，加大火力，并保持瓶內(nèi)液體微沸。隨時轉(zhuǎn)動燒瓶，使瓶壁上的內(nèi)容物全部流入消化液中，至液體呈藍(lán)綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱約40min，取下放冷，加入20mL蒸餾水，移入100mL容量瓶中，用蒸餾水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水定容至刻度，搖勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸鉀、硫酸銅、濃硫酸按同一方法做空白對照試驗。
裝好定氮蒸餾裝置，于水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)裝水約2/3處，加甲基紅指示劑數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸，以保持水呈酸性，再加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)的水。量取2％硼酸吸收液10mL置150mL的錐形瓶內(nèi)，滴加混合指示液3~5滴，并使冷凝管下端插入液面下，吸取10.0mL樣品消化液由小玻璃杯流入凱氏蒸餾器內(nèi)，并以10mL水洗滌小玻璃杯，使流入反應(yīng)器內(nèi)，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。再將10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應(yīng)室，立即將玻璃蓋塞緊，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊夾子，開始蒸餾，蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過冷凝管進(jìn)入接收瓶內(nèi)。從第一滴蒸餾液滴下起計時，蒸餾5min后，移動接收瓶，使冷凝管下端離開液面再蒸餾1min，使氨全部蒸出，可用精密pH試紙測冷凝管口的冷凝液來測定蒸餾是否完畢，中性則說明已蒸餾完全。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。同時吸取10.0mL試劑空白消化液按上述方法操作。
通過凱氏定氮儀對刺槐花蛋白質(zhì)含量的檢測，更讓我們對刺槐花的營養(yǎng)價值得到進(jìn)一步的驗證，也不在有任何不信任的感覺。
凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)的主要原理是，蛋白質(zhì)是含氮的有機化合物。刺槐花中含氮的有機化合物與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)含量。
凱氏定氮儀具體的操作細(xì)節(jié)如下：
精密稱取樣品2.0g于500mL干燥的凱氏定氮瓶中，加入硫酸鉀6.0g、硫酸銅0.2g以及濃硫酸20mL，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上，小火加熱，待內(nèi)容物全部炭化，泡沫完全停止后，加大火力，并保持瓶內(nèi)液體微沸。隨時轉(zhuǎn)動燒瓶，使瓶壁上的內(nèi)容物全部流入消化液中，至液體呈藍(lán)綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱約40min，取下放冷，加入20mL蒸餾水，移入100mL容量瓶中，用蒸餾水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水定容至刻度，搖勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸鉀、硫酸銅、濃硫酸按同一方法做空白對照試驗。
裝好定氮蒸餾裝置，于水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)裝水約2/3處，加甲基紅指示劑數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸，以保持水呈酸性，再加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)的水。量取2％硼酸吸收液10mL置150mL的錐形瓶內(nèi)，滴加混合指示液3~5滴，并使冷凝管下端插入液面下，吸取10.0mL樣品消化液由小玻璃杯流入凱氏蒸餾器內(nèi)，并以10mL水洗滌小玻璃杯，使流入反應(yīng)器內(nèi)，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。再將10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應(yīng)室，立即將玻璃蓋塞緊，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊夾子，開始蒸餾，蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過冷凝管進(jìn)入接收瓶內(nèi)。從第一滴蒸餾液滴下起計時，蒸餾5min后，移動接收瓶，使冷凝管下端離開液面再蒸餾1min，使氨全部蒸出，可用精密pH試紙測冷凝管口的冷凝液來測定蒸餾是否完畢，中性則說明已蒸餾完全。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下接收瓶。同時吸取10.0mL試劑空白消化液按上述方法操作。
通過凱氏定氮儀對刺槐花蛋白質(zhì)含量的檢測，更讓我們對刺槐花的營養(yǎng)價值得到進(jìn)一步的驗證，也不在有任何不信任的感覺。
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